Northern的杂交有哪些过程？
Northern杂交的总体过程与Southern杂交相似，只不过在印迹（Blotting）过程中转移的是RNA而不是DNA，这种将RNA样品从凝胶转移滤膜的方法，其设计者为之起了一个与Southern：blotting对应的名称Northern：blotting。
其分子杂交过程与Southern分子杂交方式是相同的。Northern杂交主要用来检测细胞或组织样品中是否存在与探针同源的mRNA分子，从而判断在转录水平上某基因是否表达，在有合适对照的情况下，通过杂交信号的强弱可比较基因表达的强弱。
northern杂交的基本原理 流程和主要目的分别是什么 基因工程复习~
①Southern印迹杂交：用于分析DNA,包括两个主要过程：一是印迹,即将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物（硝酸纤维素膜或尼龙膜）上；二是退火,与固定于膜上的同位素标记的探针进行分子杂交,并进行显影观察,这样即可查找所需DNA的位点.
②Northern印迹杂交：将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上,用特异序列DNA探针与其杂交,再显影观察,主要用于分析RNA.
两者利用的其实就是碱基互补配对的原则.
区别：研究的对象不同。southern主要的对象是DNA，northern研究的对象是RNA，而western研究的对象为蛋白质。
1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。
2、Northern印迹杂交（Northern blot）。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。与Southern杂交不同的是，总RNA不需要进行酶切，即是以各个RNA分子的形式存在，可直接应用于电泳。
3、 Western Blot中文一般称为免疫着色。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。
扩展资料：
杂交流程：
1、Southern印迹杂交技术包括两个主要过程：一是将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物（硝酸纤维素膜或尼龙膜）上，即印迹（blotting）；二是固定于膜上的核酸同位素标记的探针在一定的温度和离子强度下退火，即分子杂交过程。
2、Northern blot：在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，继而按照同Southern Blot相同的原理进行转膜和用探针进行杂交检测。
3、Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
Northern杂交的总体过程与Southern杂交相似，只不过在印迹（Blotting）过程中转移的是RNA而不是DNA，这种将RNA样品从凝胶转移滤膜的方法，其设计者为之起了一个与Southern：blotting对应的名称Northern：blotting。其分子杂交过程与Southern分子杂交方式是相同的。Northern杂交主要用来检测细胞或组织样品中是否存在与...
①Southern印迹杂交：用于分析DNA,包括两个主要过程：一是印迹,即将待测定核酸分子通过一定的方法转移并结合到一定的固相支持物（硝酸纤维素膜或尼龙膜）上；二是退火,与固定于膜上的同位素标记的探针进行分子杂交,并进行显影观察,这样即可查找所需DNA的位点.②Northern印迹杂交：将RNA从琼脂糖凝胶中转印到...
以下是北方印迹杂交的详细制备步骤:1. 准备总RNA（10-20μg）, 用含有甲酰胺、Northern印迹杂交10×MOPS缓冲液和甲醛溶液的溶液在65℃水浴中温育5分钟，然后迅速冷却，加入上样缓冲液，置于配制好的甲醛\/琼脂糖凝胶中。进行电泳时，需在通风橱内操作，带上手套，使用专用的RNA电泳槽。2. 在电泳过程中...
Northern印迹杂交（Northern blot）。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。DNA印迹技术由Southern于1975年创建，称为Southern印迹技术，RNA印迹技术正好与DNA相对应，故被称为Northern印迹杂交，与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Western blot。Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列...
所用于分析的对象不同。 Northern杂交用于分析RNA； Southern杂交用于分析DNA； Western杂交用于分析蛋白质。大致过程如下： (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶
首先，Northern印迹杂交主要用来研究RNA。它的步骤包括：首先，通过酶切法处理DNA，随后通过凝胶电泳分离出各种不同的酶切片段，接着使DNA片段在电泳过程中发生变性，使其更容易与RNA结合。接着是Southern印迹杂交，主要针对DNA分子。这个过程涉及将处理后的DNA片段转移到固体支持物，如硝酸纤维素滤膜或尼龙膜...
Northern印迹杂交是一种RNA检测技术，其基本原理与Southern印迹杂交中的DNA吸印相似。主要区别在于RNA处理步骤，Northern印迹前，使用甲基氢氧化银、乙二醛或甲醛对RNA进行变性，而非NaOH，因为NaOH会破坏RNA的2'-羟基基团。这样处理后的RNA更易于在转印过程中与硝酸纤维素膜结合。通常在高盐条件下进行转印，...
印迹杂交技术，包括Northern和Southern两种形式，是RNA和DNA分析中常用的实验手段。与Southern印迹相似，Northern印迹的准备步骤中，RNA先通过甲基氢氧化银、乙二醛或甲醛变性，而非NaOH，因为NaOH会水解RNA的2'-羟基基团。变性后的RNA更易在硝酸纤维素膜上吸附，但需在高盐条件下进行转印，转印后需用低盐...
Northern杂交与Southern杂交很相似。主要区别是被检测对象为RNA,其电泳在变性条件下进行,以去除RNA中的二级结构,保证RNA完全按分子大小分离。变性电泳主要有3种:乙二醛变性电泳、甲醛变性电泳和羟甲基汞变性电泳。电泳后的琼脂糖凝胶用与Southern转移相同的方法将RNA转移到硝酸纤维素滤膜上,然后与探针杂交。
(1)Soutliern Blotting：特指DNA印迹杂交；(2)Northern Blotting：特指RNA印迹杂交；(3)Western blotting：特值蛋白质印迹杂交。例如：Southern Blotting(印迹法)基本流程：组织或细胞→基因组DNA→限制性内切酶酶切→琼脂糖凝胶电泳→印迹转移至滤膜→预杂交→加入探针→杂交→洗膜→放射自显影。[考点]以...
