northern印迹杂交简介
Northern印迹杂交是一种RNA检测技术，其基本原理与Southern印迹杂交中的DNA吸印相似。主要区别在于RNA处理步骤，Northern印迹前，使用甲基氢氧化银、乙二醛或甲醛对RNA进行变性，而非NaOH，因为NaOH会破坏RNA的2'-羟基基团。这样处理后的RNA更易于在转印过程中与硝酸纤维素膜结合。通常在高盐条件下进行转印，但为了确保RNA稳定，转印后需用低盐缓冲液清洗，以防RNA被洗脱。
在实验过程中，不能在胶中添加EB，因为它会干扰RNA与膜的结合。为了确定样品中RNA片段的大小，可以同时在胶中加入分子量标记物，通过电泳后，标记物会被切下并上色，然后通过照相记录。而样品胶则进行Northern转印。标记物的上色方法是在暗室中将其浸入含有5μg/ml EB的0.1mol/L醋酸铵溶液中10分钟，然后在紫外光下通过一次成像相机拍照。在此过程中，要尽量减少RNA胶接触紫外光，过度曝光会导致RNA信号降低。
在使用琼脂糖凝胶分离完整mRNA时，甲基氢氧化银虽然能有效且可逆地变性RNA，但其毒性需引起注意。因此，甲醛更常被选择作为替代变性剂。在整个实验操作中，务必避免RNase的污染，以保证实验结果的准确性。
扩展资料
Northern印迹杂交（Northern blot）。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。DNA印迹技术由Southern于1975年创建，称为Southern印迹技术，RNA印迹技术正好与DNA相对应，故被称为Northern印迹杂交，与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Western blot。
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在进行Northern印迹杂交实验时，你需要准备一系列的试剂，包括10×MSE缓冲液（含有MOPS、醋酸钠和EDTAPH8.0）、5×载样缓冲液（甘油、EDTA和溴酚蓝）、37%甲醛（需在通风柜中配制）、20×SSC、去离子甲酰胺、50mmol\/LNaOH（含10 mmol\/L NaCl）以及0.1mol\/LTris，pH7.5。实验步骤如下：在40ml...
以下是北方印迹杂交的详细制备步骤:1. 准备总RNA（10-20μg）, 用含有甲酰胺、Northern印迹杂交10×MOPS缓冲液和甲醛溶液的溶液在65℃水浴中温育5分钟，然后迅速冷却，加入上样缓冲液，置于配制好的甲醛\/琼脂糖凝胶中。进行电泳时，需在通风橱内操作，带上手套，使用专用的RNA电泳槽。2. 在电泳过程中...
核酸分子杂交技术一般可分成两种，一种是窄缝杂交，另一种是印迹转移杂交。窄缝杂交由于加样最准确性及特导性较差，现在已很少应用。印迹转移杂交也分成两种，一种是Southern blot杂交，用于检测DNA样品；另一种是Northern blot杂交，用于检测RNA样品。简单介绍一下这些技术的原理，注意事项及应用。（1）...
发明人 1975年,Southern印迹杂交（Southern blot）由英国人埃德温·迈勒·萨瑟恩 （Edwin Mellor Southern）创建。
Southern印迹后的滤膜仍需进行固定处理，对NC膜可用80℃真空烘烤2小时，对尼龙膜还可用短波紫外线（波长254nm）照射几分钟。 （Northern blot） Northern印迹是指将RNA片段变性及电泳分离后，转移到固相支持物上的过程。RNA样品经Northern印迹后进行杂交反应可鉴定其中特异 mRNA分子的量与大小。Northern印迹的...
southern blot是Southern这个人发明的，是“核酸杂交技术”结合“核酸印迹技术”的经典实验。大致原理是：不同来源的核酸分子，经变性、退火处理，当它们之间有碱基互补配对时，就可能会结合在一起。形成DNA\/DNA，DNA\/RNA杂交体。那么我们可以根据这个原理，设计针对目的DNA的核酸探针（常见的有cDNA探针、RNA...
由于这种技术类似于用吸墨纸吸收纸张上的墨迹，因此称为“blotting”，译为印迹技术。生物大分子印迹技术发展极为迅速，己广泛用于 DNA、RNA、蛋白质的检测。通常人们将DNA印迹技术称为Southern blotting，将RNA印迹技术称为Northern blotting，将蛋白质印迹技术称为Western blotting，将不经凝胶的印迹技术称为...
Northern印迹分析（Northern Blotting）：Northern印迹分析通过电泳分离RNA样品，并将其转移到膜上，然后使用与目标RNA互补的DNA或RNA探针进行杂交。这种方法可以确定RNA的大小、数量和分子量，并检测特定的RNA序列。RNA测序（RNA Sequencing，RNA-Seq）：RNA测序是通过高通量测序技术对RNA样本进行全基因组水平的...
Northern印迹杂交用于分析RNA Southern印迹杂交用于分析DNA Western印迹杂交用于分析蛋白质核糖核酸是RNA 脱氧核糖核酸才是DNA 测序是为测定基因全序列,预测罹患多种疾病的可能性.
操作方法与Southern blotting相似，但不需要限制性内切酶切割。3、蛋白质的印迹分析（Western blotting）与Southern或 Northern杂交方法类似，但Western采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色"用标记的二抗，该检测技术往往需要抗体。三种印迹技术的特点：1、预定性，即它可以...
