三种印迹技术的原理及区别
三种印迹技术的原理及区别：印记技术是指将在凝胶中别离的生物大分子转移或直接放在固定化介质上并加以检测分析的技术。它主要包括 DNA 印迹技术 (Southern blot) 、 RNA 印迹技术 (Northern blot) 和蛋白质印迹技术 (Western blot) 等。
原理：
当模板分子（印迹分子）与聚合物单体接触时会形成多重作用点，通过聚合过程这种作用就会被记忆下来，当模板分子除去后，聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴，这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。
区别：
1、DNA印迹技术（Southern blotting）
基因组经限制性内切酶消化后，进行凝胶电泳，将含有DNA片断的凝胶放入变性溶液变性后，将硝酸纤维膜(NC)膜放在胶上，上面放吸水纸巾，利用毛吸作用使胶DNA转移质NC膜上，然后利用杂交技术检测NC膜上的DNA片断。
2、RNA印迹技术（Northern blotting）
操作方法与Southern blotting相似，但不需要限制性内切酶切割。
3、蛋白质的印迹分析（Western blotting）
与Southern或 Northern杂交方法类似，但Western采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色"用标记的二抗，该检测技术往往需要抗体。
三种印迹技术的特点：
1、预定性，即它可以根据不同的目的制备不同的MIPs，以满足各种不同的需要。
2、识别性，即MIPS是按照模板分子定做的，可专一地识别印迹分子。
3、实用性，即它可以与天然的生物分子识别系统如酶与底物、抗原与抗体、受体与激素相比拟，但由于它是由化学合成的方法制备的，因此又有天然分子识别系统所不具备的抗恶劣环境的能力，从而表现出高度的稳定性和长的使用寿命。
印迹技术就是将在凝胶中分离的生物大分子，转移（印迹）或直接放在固定化介质上并加以检测分析的技术。印迹技术目前有：1、DNA印迹技术（Southern blotting）；2、RNA印迹技术（Northern blotting）；3、蛋白质的印迹分析（Western blotting）等三种类型。
原理
1、DNA印迹技术（Southern blotting）
硝酸纤维膜或尼龙滤膜对单链DNA的吸附能力很强，当电泳后凝胶经过DNA变性处理，覆以上述滤膜，再于其上方压上多层干燥的吸水纸，借助对深盐溶液的上吸作用，凝胶上的单链DNA将转移到滤膜上。主要用于基因组 DNA的定性和定量分析，亦可分析重组质粒和噬菌体。
2、RNA印迹技术（Northern blotting）
RNA 印迹技术又称Northern blotting，其基本原理与Southern blotting相同，主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA 的表达水平，也可以比较不同组织和细胞中的同一基因的表达情况。
3、蛋白质的印迹分析（Western blotting）
又称蛋白质印迹术或免疫印迹技术，指蛋白质在经聚丙烯酰胺电泳分离之后转移到膜上，再与溶液中的其它抗体探针相互结合的技术。用于检测样品中特异性蛋白质的存在、细胞中特异蛋白质的半定量分析以及蛋白分子间的相互作用研究等。
区别
1、操作方法上的区别
（一）DNA印迹技术（Southern blotting）
基因组经限制性内切酶消化后，进行凝胶电泳，将含有DNA片断的凝胶放入变性溶液变性后，将硝酸纤维膜(NC)膜放在胶上，上面放吸水纸巾，利用毛吸作用使胶DNA转移质NC膜上，然后利用杂交技术检测NC膜上的DNA片断。
（二）RNA印迹技术（Northern blotting）
操作方法与Southern blotting相似，但不需要限制性内切酶切割。
（三）蛋白质的印迹分析（Western blotting）
与Southern或 Northern杂交方法类似，但Western采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色"用标记的二抗，该检测技术往往需要抗体。
2、应用方面的区别
DNA印迹技术主要用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的分析。RNA印迹技术则是用于基因RNA表达的特异性分析和定量分析。蛋白质的印迹分析技术广泛应用于检测蛋白水平的表达，作用于蛋白质定性定量及相互作用研究。
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