分子遗传标记作图是什么 ?? 此图 有什么功能?????

遗传作图(genetic mapping)是指应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。遗传学技术包括杂交育种实验,对人类则是检查家族史或系谱。与任何一种图一样,一个遗传图必须显示出显著特征的位置,在地理图中,标记是图中可以识别的部分,如河流、道路以及建筑物1 形态学标记最初的遗传学图是在20世纪初对果蝇等生物构建的,使用基因作为际记:许多年之后人们才认识到基因是DNA分子的片段。而在当时,基因被认为是能将可遗传的性状从亲木传递到后代的抽象实休 一个遗传性状必须以两种替换形式或表型(phenotype)存在才能用于遗传学分析。如孟德尔首光研究的豌豆茎的高或矮。每种表型是由相应基因的不同等位基因(allele)所决定的。起切只有那些能通过视觉区分的基因表型能用于研究。比如,第一张果蝇遗传图显示了负责身体颜色、眼睛颜色、翅膀形态等基因的位置,这些表型都可在低倍显微镜下或肉眼观察果蝇而看到。早期尚觉得这种方法很精细,但遗传学家们很快就发现,只有有限的几种可见表型的遗传可用于研究,而在许多情况下,由于不止一个基因影响一个物理特征,分析起来并不大容易。例如,到1(J22年,有超过50个基因被定位在4条果蝇染色体上、而其中9个基因负责眼睛的颜色,想在此领域有所贡献的每一个初涉者必须首先学会辨别果蝇眼睛的颜色是红、淡红、朱红、朽榴石色、康乃馨色、肉桂色、深褐色、猩红或深红色。因此,为了使基因图更加全而,有必要找到一些比可见的性状更多、更明确而且更简单的性状。2 生化标记以上问题的解决方案之一是应用生物化学方法来区分表型。这对于微生物与人类这两种生物尤为重要,细菌与酵母等微生物只有为数很少的可见性状,因此这类生物的基因作图只能依赖于少数的生化表型。人类虽然有可见的性状持征,但以血液分型为代表的生化表型研究从20世纪20午代就开始了。血液分型研究不仅包括如ABO系统的标准血型,还有血清蛋白以及人类白细胞抗原〔HLA系统)等免疫蛋白的等位基因可变体。这些标记相对于可见表型的一个巨人优点是其相关基因往往为复等位基因(multiple allele)。例如,HLA—DRBI基因至少有59个等位基因,而HLA- B至少有60个。这正是与人类作图相关的。与在果蝇或小鼠等生物中建立的杂交实验不同,人类基因遗传的数据只能通过检查—个家族中各成员的表型来获得。如果对所研究的基因而言,所有的家族成员都为纯合子,就得不到有用的信息。这对于只有两个等位基因的基因较常见,因为婚配可偶然地发生于同一个等位基因纯合子个体之间。而当所研究的基因有60个而不是2个等位基因时,这就很少见了。简单的说:形态标记和生化标记的局限性在于多态性太低,可标记的位点太少。这是他们共同的致命弱点。3 DNA分子标记DNA 分子标记大多是以DNA片段电泳谱带形式表现的。依其遗传特性可分为显性和共显性标记2种;依多态性检测手段可分为以Southern 杂交技术为核心的分子标记和以PCR 技术为核心的分子标记;根据在基因组中出现的频率,又可分为低拷贝序列和重复序列标记。(1)限制性片段多态性( Rest riction Fragment Length Polymorphism ,RFL P)RFILP是第—种用于研究的DNA标记。限制性核酸内切酶是一种在特定序列上切割DNA分子的酶,用它处理一个DNA分子时,即产生限制片段。这种序列特异性意味着用一种限制酶处理一种DNA分子总会产生同样的片段。但对于基因组DNA来说,并不总是这样。这是因为有些限制位点具多态性,以两种等位形式存在。一种等位形式有正确的限制位点序列,能被酶切开;另一等位形式的序列有改变,从而该限制位点不能被识别。后者的结果是在核酸内切酶处理后,两个相邻的限制片段仍然连接在一起,从而导致了长度多态性(如图1)。这就是一个RFLP的例子。如同用基因作为标记一样,RFLP在基因组图谱上的位置可以通过追踪其等位基因的遗传而得到。人类基因组中大约有100000个RFLP,但是理所应当的每个RFLP只能有两种等位形式(有或没有这个位点),这就限制了RFLP在人类基因作图上的应用价值,因为一个家庭的所有成员很可能都是某一个RFLP的纯合子。(简单来说,它不能区分纯合子和杂合子) (2)随机扩增片段长度多态性标记(Random Amplified Polymorphic DNA ,RAPD)RAPD 技术是由Williams等首先创立的一种DNA分子标记技术,利用单一的10个碱基寡核苷酸作为引物,对基因组DNA进行PCR扩增。经琼脂糖凝胶电泳来检测DNA序列多态性。(3)扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism ,AFLP)AFLP是Zeabeau 等(1993) 发明的一项技术,它既有RFL P的可靠性,又有RAPD 的方便性。其基本原理是通过PCR 扩增基因组DNA 片段,扩增产物的变性聚丙烯酰胺电泳显示扩增片段长度多态性,其中引物= 接头+ 酶切位点+ 2~3 个核苷酸。AFLP技术分析流程: (1)DNA 模板制备; (2) 提取样本DNA 经浓度和质量检测后,一般采用双酶( EcoRI 和MSEI 或Pst I 或TaqI) 酶切, 在基因组DNA 上产生低频和高频切口;(3) 选择性扩增酶切片段。酶切后,限制性片段在T4 连接酶作用下与特定接头连接,形成带有接头的特异性片段; (4) PCR 前扩增,一般用带一个选择性引物进行预扩增,反应条件与常规PCR 反应基本一致; (5) 利用放射性同位素标记或荧光标记PCR 引物; (6) 在Taq 聚合酶作用下完成94 ℃变性30 s ,65 ℃淬火30 s ,72 ℃延伸60 s ,PCR 扩增36 个循环; (7) PCR产物在含尿素聚丙烯酰胺上电泳; (8) 将电泳后的凝胶转移到吸附滤纸上,经干胶仪进行干胶处理; (9) 在X 光片上感光,数日后冲洗胶片并进行结果分析。AFL P 反应起始一般高温复性(一般65 ℃) ,因此只有那些与3’端严格配对的片段才能得到扩增,选择性很强。实验结果稳定,重复性好,呈典型的孟德尔式遗传,每个AFL P 可以获得50~100 条谱带信息,多态性强。(4)微卫星(Microsatellite)微卫星是指以几个(1~6 bp) 核苷酸为单位,多次串联重复序列,也称之为简单重复序列(single sequence repeats ,SSR) 、短串联重复序列(short tandem repeats ,STR) 或简单序列长度多态性(single sequence length polymorphism ,SSL P) 。广泛分布于真核生物基因组中,大约每隔10~50 bp 就有一个微卫星,由于重复次数和重复程度的不完全而造成每一个位点的多态性。(5)单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP )基因组中存在单个的点突变,且数量极大,有些也对产生RFLP,但许多并个能。这是囱为它们所处的序列不能被限制件内切核酸酶所识别。在人类基因组中,据认为有200000个以上的SNP(single nucleotidc polymorphism)位干基因内.而且有更多的SNP位于非基因的DNA中。每个SNP只有两个等位基因,所以这些标记在人类绘制遗传图谱方面又与RFLP同样的缺点:对于一个SNP,很可能—个家族的所有成员都是纯合子。SNP的优点是它数目庞大,而且对SNP分型所用的方法不需凝胶电泳。这非常重要,因为已证明凝胶电泳很难实现自动化,所以使用它的检测方法相对缓慢而且费力。由于SNP以寡核苷酸杂交分析(oligonucleotide hybidization analysis)为基础,故其检测更快速。寡核苷酸是在试管中合成的通常小于50个核苷酸的短单链DNA分子。在适当的条件下,一个寡核苦酸与另一个DNA分子仅在可形成完全的碱基配对结构时才能杂文。如果有一个错配,寡核昔酸上就有一个位置不能形成碱基对。则不能杂交(图1)。因此寡核苷酸杂交能区分一个SNP的两个等位基因。筛选策略包括:DNA芯片(DNA chip)技术:DNA芯片是一块面积为2cm平方或更小的硅片,以高密度排列方式携带有许多不同的寡核苷酸。待测DNA用荧光标记后加到芯片的表面。用荧光显微镜观察杂交情况,显示荧光信号的位置即表示该处的寡核苷酸与待测DNA发生了杂交。因此一个实验中可以量化许多SNP。动态等位基因特异的杂交(dynamic allele-specific hybridization, DASH):在这种技术中,杂交在溶液中进行,比如在96孔微量滴定板的一个孔中进行G荧光标记只能与双链DNA结合,因此只有发生了杂交才能检测到信号。开始,杂交在允许有错配的条件下进行。在这个阶段,无论待测DNA含有哪一种SNP等位基因,寡核苷酸都能与之杂交。由于错配的杂交产物不如完全杂交产物稳定,故在较低温度解链.因此可以通过升高温度来区分等位基因。这样就可以从使杂交依赖性荧光信号消失的温度来判定待测DNA中存在哪一种等位基因。 http://news.biox.cn/content/200811/20081124113214_6603.shtml

分子遗传标记作图是什么 ?? 此图 有什么功能?????~

遗传图是人类基因组计划中的四张图中的一张,这张图显示了人类染色体上基因的相对位置与连锁情况,能根据一些明显的标记判断基因的有无

你的问法有点小问题,什么叫得到遗传标记的作用?各种遗传标记就是用来作图的。
是想问为什么测序之前要作图吗?如果是,因为这是一个全基因组测序策略,人类基因组计划就是先作出草图,然后再对每个叠连群中的克隆进行测序。